取5 µg重组蛋白，与等体积的2×蛋白上样缓冲液混匀后沸水浴5 min，12, 000 r/min离心5 min，离心后取上清点样到15%的SDS聚丙烯酰胺凝胶，连接电源后电泳，浓缩胶时用8 V/cm电压，待染料前沿进入分离胶后将电压提高到15 V/cm继续电泳，直到溴酚蓝染料到达分离胶的底部，关掉电源。取出凝胶，装备染色。
SDS聚丙烯酰胺凝胶的染色
在90 mL甲醇：水(1：1，v/v)和10 mL冰乙酸的混合液中溶解0.25 g考马斯蓝亮R-250，滤纸过滤以去除颗粒状物质。
用至少5倍体积的染液浸泡凝胶，放在平缓摇动的平台上于室温染色4小时以上。
移出并回收染液以备后用，将凝胶浸泡于不加染料的甲醇-乙酸溶液中，平缓摇动4-8小时，其间应更换脱色液三四次。
Western印迹
蛋白电泳分离后用Bio-Rad半干转移仪将蛋白转移到硝酸纤维素(NC)膜上(5 V 转移过夜)。
转移结束后关掉电源，取出NC膜放入容器(培养皿)中，加适量的封闭缓冲液(含5%(w/v)脱脂奶粉的PBS缓冲液)，室温轻轻摇动温育1-2小时。
换新的培养皿，加入10 mL上述封闭缓冲液，并按1：2000的比例加入兔抗CT抗血清，4 °C温育2小时。
PBS缓冲液洗涤三次，每次10 min。
将NC膜转移至另一培养皿中，加适量二抗缓冲液(150 mM NaCl, 50 mM Tris-Cl, pH 7.5)，室温洗涤10 min。
倒去缓冲液，加入含有5%脱脂奶粉的上述二抗缓冲液，并以1：5000量加入二抗(碱性磷酸酶偶联的羊抗兔IgG)，室温摇动温育1小时。
再将NC膜转移至另一培养皿中，加适量二抗缓冲液(150 mM NaCl, 50 mM Tris-Cl, pH 7.5)，室温洗涤三次，每次10 min。
加酶联抗体生色底物(10 mL碱性磷酸酶缓冲液，66 µL NBT， 33 µL BCIP，混匀)室温摇动温育。
蛋白带颜色达到要求后，把膜转移到另一培养皿中，加终止液(40 µL 0.5M EDTA，10 mL PBS)终止反应，扫描。