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转水稻农杆菌(EHA105)电击感受态细胞的制备
发表时间:2012-09-14 阅读次数:1402次

 

1. 接种(eg.3ML) overnight 28℃
2. 1:100放大培养(eg。300ML YEB中)至OD=0.5
3. ice chilled   5000rpm 10min (冷冻离心机,预冷到4℃)
4. Washed by 1mM HEPES (PH7.0) 3次(每次10ML)
5. 10%甘油洗一次
6.溶于3ML 10%甘油中,40uL 每管于 -70℃保存
 
备注:离心管,dorf管,HEPES,甘油均须冰上预冷,所有的操作以在冰上进行为好.  
 

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