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大肠杆菌重组蛋白的诱导表达
发表时间:2012-09-14 阅读次数:1338次

 

1.  重组表达质粒热击转化大肠杆菌 BL21(DE3),37 °C温箱培养过夜;
 
2.  挑取重组大肠杆菌菌落接入3~5 ml含卡那霉素 (50 mg/L) 或氨苄青霉素(Ampicillin, 100 mg/L) 的LB培养液,于37 °C振荡培养过夜。
 
3.  按1:100的接种量将过夜培养物接入500 ml含卡那霉素(50 mg/L) 或氨苄青霉素(Ampicillin, 100 mg/L)的LB培养液,37 °C振荡培养至对数中期(OD550=0.5-0.6)。
 
4.  以1:1000的比例加入1M IPTG,37 °C振荡培养5 h。
 
5.  4 °C 8000 rpm 离心10 min收集菌体细胞。

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