内部访问登录界面
登录密码:
     
常用资料
当前位置:首页 >> 常用资料 >> 实验方法资料
大肠杆菌重组蛋白的诱导表达
发表时间:2012-09-14 阅读次数:3523次

 

1.  重组表达质粒热击转化大肠杆菌 BL21(DE3),37 °C温箱培养过夜;
 
2.  挑取重组大肠杆菌菌落接入3~5 ml含卡那霉素 (50 mg/L) 或氨苄青霉素(Ampicillin, 100 mg/L) 的LB培养液,于37 °C振荡培养过夜。
 
3.  按1:100的接种量将过夜培养物接入500 ml含卡那霉素(50 mg/L) 或氨苄青霉素(Ampicillin, 100 mg/L)的LB培养液,37 °C振荡培养至对数中期(OD550=0.5-0.6)。
 
4.  以1:1000的比例加入1M IPTG,37 °C振荡培养5 h。
 
5.  4 °C 8000 rpm 离心10 min收集菌体细胞。

| 网站管理 | 联系我们 | 添加收藏 | 设为首页 |

版权所有 © 上海交通大学植物发育生物研究室 技术支持:维程互联

网站访问量:
track internet traffic