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水稻组织RNA提取(Trizol法)
发表时间:2012-09-14 阅读次数:1284次

采用的申能博彩的Trizol试剂

自备试剂:
DEPC-H2O,氯仿,异丙醇,无水乙醇,70%乙醇

方法:
1.组织样品用液氮速冻,将组织(根,茎,叶,花)磨成粉末,称趁液氮尚未挥发光时,把粉末转到1.5ml小管中,加入800ulTrizol
2.加入200ul氯仿,剧烈震荡混匀
3.于4度离心12000rpm,5分钟
4.将上清转入1.5ml小管中,加入与上清等体积的异丙醇,-20度放置1小时或更长(充分沉淀)不要吸取中层物质,否则会有DNA污染
5.于4度离心12000rpm,5min
6.小心移去上清,防止沉淀丢失
7.用70%乙醇洗2遍,每次700ul,12000rpm,4度,5分钟
8.小心的尽可能吸走上清,超净台上倒置将酒精空干
9.加入30ulDEPC-H2O溶解,-70度保存

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